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用途：磷酸鈣細胞轉染
更新時間：2025-05-13
外源基因導入真核細胞的方法有很多種，如磷酸鈣轉染法、DEAE-葡聚糖轉染法、脂質體法、電穿孔法、顯微注射法等，2×HEPES緩沖鹽溶液主要用于磷酸鈣轉染，其主要成分為HEPES，HEPES是一種非離子兩性緩沖劑，能有效控制pH在6.8～8.2范圍，尤其在pH7.2～7.4具有較好的緩沖能力，終濃度一般為10～50mmol/L，培養液內含20mmol/L HEPES即可達到較好的緩沖能力。
Leagene HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細胞轉染溶液，主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成，其pH值約為6.7，經過濾除菌處理；影響磷酸鈣轉染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA在細胞上停留的時間、休克時間，Leagene 2×HeBS要求DNA濃度在10～50μg為宜，Hela、BALB等細胞沉淀放置16h，CHO、DUKX、BⅡ等細胞可以通過甘油、DMSO進行熱休克處理以提高轉染效率。該試劑僅用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。
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